本产品用于捕获肺癌突变抗原结合的T细胞，该产品已经过流式检测、流式分选后TCR测序验证，确保每个突变均有结合的T细胞。本产品全称为DNA编码的肺癌突变蛋白MHC荧光复合物(简称LungCan-DfpMHC)，包含肺癌54种突变抗原肽，抗原肽与HLA的复合物经过DNA编码修饰并偶联荧光素。使用价值是：
- 若配合使用流式分析仪，可以检测54种突变抗原特异性T细胞的数量。
- 若配合使用NGS DNA测序，可解析出54种常见突变抗原结合的T细胞数量。
- 若结合单细胞转录组测序和单细胞TCR测序，则可以立体式地分析出54种突变抗原的T细胞克隆型，以及每种突变抗原特异性T细胞的细分亚型和功能特性。
LungCan-DfpMHC产品价值在于，判断患者肺癌突变抗原是否被免疫细胞所识别，判断识别突变的免疫细胞数量，判断识别不同突变位点的免疫细胞克隆性增殖能力，判断识别不同突变的免疫细胞功能。
试剂盒主要成分
本产品主要由抗原肽和HLA形成多聚复合物组成，是多肽、HLA、DNA标签、荧光素的复合物。抗原肽来自于肺癌突变频率Top 100的突变位点表达蛋白，经过抗原特异性结合实验、HLA质谱、单细胞TCR测序等手段验证，最终筛选获得54种突变抗原肽HLA复合物，这54种突变可以被T细胞识别。
检测原理
本产品由54种抗原肽和HLA的复合物形成多聚体(简称：LungCan DfpMHC)，高亲和力地结合T细胞表面的TCR(T细胞受体)，同时复合物设计了随抗原肽不同的DNA标签序列和PE。本产品和T细胞共孵育后，LungCan DfpMHC通过TCR结合T细胞。
由于LungCan DfpMHC携带PE，所以流式检测可发现结合肺癌突变抗原特异性T细胞数量，流式分选可捕获肺癌突变抗原特异性T细胞用于进行功能测试、信号通路、克隆亚型分析。流式分选后的肺癌突变结合性T细胞混杂有多种类型，每种类型的T细胞结合不同突变蛋白。若需要进一步分析不同突变特异性T细胞的数量，通过抗原肽特异性DNA标签序列构建文库并测序，对测序的reads数量计数，将获得不同突变特异性T细胞的数量。结合有较强的与免疫细胞TCR的亲和力。
样本要求与使用方法
- 研究循环细胞中的肺癌突变抗原特异性T细胞，使用新鲜PBMC、冻存PBMC；
- 研究肿瘤浸润淋巴细胞的肺癌突变抗原特异性T细胞，使用新鲜肿瘤细胞悬液、冻存肿瘤细胞悬液。
检测结果样式
使用LungCan DfpMHC捕获6个患者的外周血PBMC，获得肺癌主要突变抗原结合的CD8+ T细胞。上图显示PD1抑制剂敏感组突变 ZNF692 8S>F、ZHX2 38P>L、SCML2 385P>L相对于对照(PD1抑制剂耐药组)的均有高水平的CD8+ T细胞结合。该数据是在T细胞被LungCan DfpMHC捕获后，通过NGS测序后，获得每种突变抗原DNA标签的reads数量，该Reads数量直接反映T细胞数量。
产品规格
25反应/试剂盒
50反应/试剂盒
参考文献
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