本项技术提供了抗原肽与HLA-I结合形成的评估服务，评估出被HLA呈递的抗原肽。该技术用于抗原特异性T细胞的各种应用，比如肿瘤疫苗靶点筛选，肿瘤新生抗原特异性T细胞的MHC-1多聚体合成，比如病毒疫苗相关的抗原特异性T细胞数量评估。
技术原理
本技术服务的主要原理是：存在适配抗原肽的情况下，HLA重链结合B2M与抗原肽会形成构象稳定的复合物，使用抗B2M-HRP标记抗体作为检测抗体，链霉亲和素或抗HLA抗体作为包被物，通过ELISA夹心法可检测稳定复合物的存在，并通过显色强度可以判断抗原肽-MHC复合物浓度，从而推断抗原肽与MHC的结合能力。若待测抗原肽无法与HLA结合，则无法形成稳定的复合物，检测抗体会被洗脱掉，从而ELISA结果会呈现阴性状态。
应用价值
- 肿瘤新生抗原筛选：评估肿瘤突变蛋白片段的被呈递能力，判断具有HLA特异性的肿瘤突变蛋白片段免疫原性。
- 肿瘤疫苗靶点评估：用于多样性HLA等位基因型结合的多肽谱筛选与评估。
- 肿瘤TCR-T前期靶点验证：通过验证抗原肽MHC复合物，从而扩大产量合成MHC多聚体，以获取抗原特异性T细胞克隆。
- 病毒抗原肽筛选：评估病毒抗原突变片段的被呈递能力，判断多样性HLA等位基因型结合的多肽抗原谱
- 疫苗免疫力评估：通过疫苗预设的抗原片段，确定抗原特异性T细胞特征以评估疫苗疗效。
- 自身免疫抗原筛选：评估自身抗原片段的被呈递能力，判断具有HLA特异性的自体蛋白原性。
- 器官移植抗原的筛选：同时扫描供者和受者HLA特异性抗原片段，鉴定并验证免疫排斥的新型靶点
结果形式
本方法根据HLA与抗原肽的配对方式，可有三种检测模式：
抗原肽筛选模式
该模式下，使用单一HLA类型结合多种抗原肽段，通过ELISA检测筛选出具有HLA亲和力的肿瘤新生抗原、病毒抗原肽、自免抗原、器官移植抗原，适用于应用价值中1、4、6、7种应用。用户指定的单一HLA类型由我方提供，用户提供多种多肽，在我方平台完成ELISA检测实验。
HLA适配模式
目标抗原肽在明确之后，通过扫描多种HLA类型以评估抗原肽亲和的HLA类型，从而根据HLA的人群分布频率评估适用的人群范围。疫苗开发引入该模式可评估适用人群的广泛性。用户指定的各种HLA类型均可由我方提供，用户提供单一多肽，在我方平台完成ELISA检测实验。
复合物验证模式
若后续工作是为了进一步扩大pMHC的产量，以用于TCR类抗体的开发、抗原特异性T细胞的临床检测、以及相关制药和器械产品开发，则可以针对文献、专利已验证的工艺，通过本检测进行原料验证，验证HLA、肽、B2M、折叠组装缓冲液、纯化体系的验证。
检测所需材料
- 肽：1mg干粉，由用户提供材料，或由用户提供肽段信息我方进行合成；
- HLA单体蛋白：由用户指定HLA亚型(例如：HLA-A*02:01)，我方提供单体蛋白；
- B2M：我方提供；
- 折叠组装缓冲液：我方提供
交付结果
每个待测孔(含MHC和多肽)光密度(OD)与空白孔的比值，同时检测阳性参照 (通过抗原特异性T细胞流式检测实验验证的pMHC复合物, 比如CMVpp65-HLA-A*02:01)、阴性参照(未结合肽的MHC)。