T细胞是机体免疫系统最关键的细胞之一，研究T细胞的识别、活化及频数分布是现代免疫学基础研究及应用研究的一个最重要的环节。细胞毒性T淋巴细胞在T细胞免疫应答中发挥重要作用，CTL主要识别存在于靶细胞(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)表面的抗原多肽。这种识别受MHC一I类分子的限制。CTL的主要生物学作用为参与抗病毒免疫、抗肿瘤免疫及移植排斥反应。但CTL体外培养比较困难，扩增过程带来大量非抗原表位特异性的T细胞，缺乏精确分析抗原特异CTL的频数以及快速分离扩增这类细胞的技术。
抗原特异性T细胞的检测方法
在单细胞水平研究抗原表位特异性T细胞是非常重要的。在过去通常用铬51释放测定法和有限稀释分析法来测定抗原特异T细胞反应，但这两种方法耗时、费工、不敏感，而且不能在单细胞水平上研究抗原特异性CTL。自从1996年发明了HLA一I类多肽四聚体的方法后，使得抗原特异CTL的检测迈向了新的台阶，这个新方法更敏感，可以直接体外在单个细胞水平分析抗原特异T细胞，而不需体外扩增，这样对体内免疫反应提供了更精确的描述。
抗原肽MHC复合物四聚体合成
该方法通过基因工程技术去除了HLA一I类分子a链的穿膜区和细胞质尾，把长度为15个氨基酸的BirA酶的底物肽(BSP)加在其的梭基端形成融合蛋白，在体外按一定比例与特异的抗原肽片断和微球蛋白共孵育，形成折叠正确的构象，成为MHC肤复合物，再经过纯化，把生物素标记在底物肤的赖氨酸残基上，再与标记藻蓝蛋白的链亲和素反应，形成一个标记藻蓝蛋白的链亲和素与四个生物素化的MHC肤复合物结合的四聚体。MHC肤四聚体通过模拟抗原提呈细胞与抗原特异CTL上的多个TCR结合，结合能力比MHC肽单聚体大大提高了，结合稳定性增强，不易解离，可通过灵敏度极高的流式细胞仪进行检测。
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