抗原特异性T细胞扩增与检测服务

服务价值

从PBMC中刺激出抗原特异性T细胞,本服务将交付刺激后细胞、流式检测试剂、抗原肽、流式鉴定报告。

服务内容

1. 使用抗原肽刺激目标MHC的PBMC连续14天培养扩增,期间添加包含所需细胞因子、培养基、血清、抗生素。

2. 每隔一天细胞状态拍照记录(10x 40x物镜放大倍率),并将照片提供给用户监控。

3. 收获细胞后,通过pMHC复合物荧光四聚体、抗CD8流式荧光抗体,使用流式检测抗原特异性T细胞数量(含阴性未刺激组作为对照检测)。

4. 生产抗原肽MHC复合物荧光四聚体,用于流式检测,涉及的MHC类型覆盖MHC-I型56种,MHC-II型18种。覆盖物种为:人、小鼠、恒河猴、大鼠。

用户提供

1. 抗原肽>1mg 粉剂,并提供溶剂名称。若为多肽溶剂,须标明浓度。若客户无抗原肽,可提供多肽信息,由我方合成;

2. 默认使用PBMC中单核细胞分化后的树突状细胞呈递抗原肽,用户无须提供PBMC,PBMC由我方提供。若用户需要特定患者的PBMC作为呈递细胞,须用户自主提供患者PBMC,且需要告知HLA类型(或有我方代为检测)。

3. 若用户需要特定肿瘤细胞系呈递抗原肽,可提供肿瘤细胞系,并标识肿瘤细胞系的HLA类型。若无HLA类型,可告知肿瘤细胞系名称。对用户提供的肿瘤细胞,我方将免费刺激、流式检测一次

交付标准和周期

1. 交付pMHC荧光四聚体,供用户完成从10的7次方PBMC中检测、分选抗原特异性T细胞;

2. 交付刺激后的PBMC,至少含5000个抗原特异性T细胞,可供用户完成单细胞级TCR测序;

3. 检测报告 (可扫描右侧二维码索取demo版报告),并提供流式检测原始结果。

4. 若用户未提供抗原肽,我方将交付给用户抗原肽,供用户留存使用。

服务周期为

用户提供多肽,周期为14天

我方提供多肽,周期为28天

浩生医疗提供本服务的核心能力

具有成熟优化的抗原特异性T细胞刺激流程。该刺激流程已经过大量项目验证,同时也是我方pMHC荧光四聚体阳性细胞成熟生产流程。

具有抗原肽-MHC复合物荧光流式检测试剂的合成能力,目前已成功合成5100种抗原肽-MHC复合物荧光流式检测试剂。

应用案例

1.通过HLA特异性K562呈递细胞受抗原肽刺激后,与T细胞共孵育,分离那些识别呈递细胞的T细胞受体序列,并通过临床验证确定了肿瘤新生抗原特异性TCR

T cell antigen discovery via trogocytosis. Nat Methods. 2019

2. 针对抗原特异性TCR改造后细胞毒T细胞,T2细胞用于监控这些CTL对胰腺导管癌抗原的反应

Ex Vivo PD-L1/PD-1 Pathway Blockade Reverses Dysfunction of Circulating CEA-Specific T Cells in Pancreatic Cancer Patients. Clin Cancer Res. 2017

3. 通过呈递细胞表达的肿瘤抗原肽,判断TCR样抗体的结合能力

TCR-like antibody drug conjugates mediate killing of tumor cells with low peptide/HLA targets. MAbs. 2017

4. 胞内抗原特异性CAR-T细胞攻击人工抗原呈递细胞,该人工抗原呈递细胞特异性表达胞内抗原+MHC复合物

CAR-T cells targeting a nucleophosmin neoepitope exhibit potent specific activity in mouse models of acute myeloid leukaemia. Nat Biomed Eng. 2020

5. 呈递p53突变抗原与野生型抗原的HLA-A2型人工抗原呈递细胞,被双特异性单链抗体特异性杀伤。人工抗原呈递细胞作为双特异性单链抗体杀伤效应的监控细胞。

Targeting a neoantigen derived from a common TP53 mutation. Science. 2021